Abstract:
Introdução: O tecido adiposo possui uma fração vascular estromal (FVE) rica
em células-tronco mesenquimais capazes de se diferenciar e, pela sua facilidade
de acesso (em relação à medula óssea, por exemplo), tem sido estudada como
uma fonte importante para regeneração dos tecidos. De acordocom a literatura,
o meio mais comum de coleta deste material é pela lipoaspiração corporal e
bichectomia. Objetivo: O presente estudo in vitro teve como objetivo isolar
células-tronco mesenquimais de tecido adiposo proveniente da lipoaspiração de
gordura submentoniana e submandibular e verificar sua viabilidade para
aplicação clínica. Materiais e Métodos: Três pacientes do sexo feminino, idade
média 56,5 anos com lipodistrofia moderada da região submentual foram
selecionadas para participarem da pesquisa. Previamente ao procedimento foi
realizado a coleta sanguínea venosa para a obtenção do PPP. A gordura extraída
na lipoaspiração da região submentual e submandibular foi enviada para o
Centro de Processamento Celular Curityba Biotech em seringas com DMEM e
submetida ao protocolo para extração da FVE. Foi realizada a lavagem da
amostra com PBS, a digestão da gordura com colagenase, centrifugação e
utilizada 10ml de tampão de lise de eritrócito para os 4 tubos a 4°C por 10
minutos. Após, foi adicionado DMEN , centrifugado e filtrado através de um filtro
de 100µm e incubado durante à noite a 37°C e 5% de CO2 em meio de controle
(DMEN 10% FBS, 1% solução antibiótica/antimicótica). As células aderentes
foram mantidas em condições decultura padrão até atingirem confluência (80-
90%). A viabilidade celular e a caracterização das células presentes na FVE
foram avaliadas por microscopia de luz e imunofenotipagem por citometria de
fluxo. Resultados: A partir do processamento foi possível obter mais de 99% de
células-tronco mesenquimais na amostra. Conclusão: O tecido adiposo
proveniente da região submentual e submandibular apresentou mais de 99% de
células-tronco mesenquimais, se caracterizando como uma importante fonte de
células-tronco.
